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      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase

      货号:125-05061
      包装:20ug x5
      • 英文名:Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade
      • 级别:for Proteome Research
      • 分子量:27,500
      • 品牌:Wako
      • 外观:Lyophilisate. Keep at -20 degrees C.
      赖氨酰肽链内切酶(Lysyl Endopeptidase)可以特异性剪切除赖氨酸残基C末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键,用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。该酶(#125-05061)稳定性高,在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30度孵育6小时之后,仍然拥有完整的生物活性。

      *西宝提示:我司所销售的化学试剂、原料等所有产品(包括但不限于抗生素类、蛋白质类、试剂盒类产品等)仅限用于科学研究用途,不得作用于人体。

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      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase
      赖氨酰肽链内切酶(Lysyl Endopeptidase)最初由Masaki等人从土壤细菌中分离得到。该酶可以特异性剪切除赖氨酸残基C末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键,用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。作为Wako官方授权分销商,西宝生物专业提供Wako多种级别赖氨酰肽链内切酶,该酶稳定性高,在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小时之后,仍然拥有完整的生物活性。订购热线:400-021-8158
      质谱级赖氨酰肽链内切酶是质谱分析前处理时最常用的蛋白分解酶。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶,可更好地切断赖氨酸基团的多肽,增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装,是方便使用的冷冻干燥品。
      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 理化特性
      表1赖氨酰肽链内切酶理化特性表
      外观
      冻干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl buffer,pH 8)
      活性
      0.03~0.07AU/vial
      分子量
      27,000(凝胶过滤);30,000 (SDS-PAGE)
      溶解性
      易溶于水或缓冲液
      最佳pH
      9.0-9.5(酰胺酶的最佳活性pH)
      等电点
      6.9-7.0
      抑制剂
      DFP、PMSF、TLCK
      来源
      细菌
      稳定性
      溶于pH 值5.0-12.0 的Tris缓冲液中,可于4℃稳定保存2年。溶于pH 值6.0-11.0 的缓冲液中,可于30℃稳定保存,但是50℃及以上不稳定。
      单位定义
      一单位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 时每分钟产生1 μmol 对硝基苯胺所需的酶量。
      底物特异性
      水解底物:Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
      非水解底物:Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA
      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品特点
      赖氨酰肽链内切酶
      • 高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析
      • 提高裂解效率、增加肽段数量
      • 根据使用量特意制备小包装,方便使用
       
      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 应用实例
      分别采用胰蛋白酶(Tp)、赖氨酰肽链内切酶(Lep) 和Tp 与Lep联用进行胶内酶切的效果比较:牛血清蛋白BSA 的条带(100ng) 通过SDS-PAGE 获得,然后分别用Tp、Lep 和Lep+Tp 进行酶切,再用MALDI-TOFMS 法进行分析。蛋白酶的实验效果如下表:
      表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切结果对照
       
      Tp
      Lep
      Lep +Tp
      裂解位点
      精氨酸和赖氨酸的C端
      赖氨酸的C端
      精氨酸和赖氨酸的C端
      错误裂解率 
      (错误裂解所占比例)
      多(8%)
      很少(0%)
      少(3%)
      鉴定出的多肽数量
      17
      19
      22
      结果表明 Lep 酶解的错误裂解率最低,Tp酶解时加入Lep后,错误裂解率有所降低,同时,可以鉴定出更多的多肽。
      胰蛋白酶 (Tp)(图 a) 和赖氨酰肽链内切酶 (Lep)+Tp (图 b) 酶切后的质谱结果对照图
      图1 胰蛋白酶 (Tp)(图 a) 和赖氨酰肽链内切酶 (Lep)+Tp (图 b) 酶切后的质谱结果对照图。
      Lep+Tp酶切后,可以在m/z=2000时得到吸收峰,而单独的Tp酶切在m/z=2000时没有吸收峰。该结果表明Lep可以提高测序覆盖度。
      ( 数据由大阪医疗中心和妇婴健康研究所Y. Wada博士提供 )
      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品列表
      品牌
      产品编号
      产品名称
      产品规格
      产品等级
      Wako
      Lysyl Endopeptidase, MS Grade
      赖氨酰肽链内切酶,MS级
      20μgx5
      质谱级
      Wako
      Lysyl Endopeptidase (R)
      赖氨酰肽链内切酶
      1vial(2AU)
      for Biochemistry
      Wako
      Lysyl Endopeptidase (R)
      赖氨酰肽链内切酶
      1vial(10AU)
      for Biochemistry
      质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 参考文献
      1. Wada, Y., and Kadoya, M.: J. Mass Spectrom., 38, 117 (2003).
      2. Shevchenko, A., Wilm, MM., Vorm, O., and Mann., M.: Anal. Chem., 68, 850 (1996).
      西宝生物专业提供Wako赖氨酰肽链内切酶,正品保障,值得您信赖!(订购热线:400-021-8158
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      西宝生物科技(上海)股份有限公司(837709.OC),2003 年成立于张江高科技园区,现已成为生命科学领域集研发、生产、贸易、进出口、技术服务一体化的综合服务商。西宝生物主营包括IVD原料,科研试剂,新材料和健康产品四大板块和服务。除自营Seebio和Canmedo(康美多)、泉养堂、五藏养生品牌外,西宝生物代理了Wako、APSC、Jackson、Ludger、Bioporto、Lumiprobe、Aalto等知名品牌。西宝生物正致力于分子诊断、转化医学、干细胞、抗衰老等研发领域,依托产学研创新平台,打造大健康产业链,以持续不竭的技术创新、稳定可靠的优质产品和专业便捷的技术服务,提供更具价值、创新性和定制化的综合解决方案,与您携手共创美好的明天。
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